Métodos de Histología
Biopsia: Muestra de tejido de un ser vivo.
Necropsia: Muestra de tejido de un ser muerto.
Toma de Muestra
Aguja: Muestra de organos sólidos. (riñón, hígado, bazo, etc.)
Disección directa: Biopsia de piel.
Raspado: Se toma la muestra de la cavidad oral, ano, útero, etc.
Endoscopía: Esófago, estómago, cólón, etc.
Punción o Cáteter: Muestra de sangre
Procesamiento
Frotis: Extendido (Sangre)
Impronta: Tejido aplastado sobre el portaobjetos, se retira el exceso y se tiñe.
Corte: Se utilizan micrótomo, ultramicrótomo, criostato, etc.
Congelación
Se obtiene la muestra.
Se le pone OCT o Goma de
Se congela con nitrógeno líquido con un crioprotector freón o isopentano a -90°C durante 10 segundos.
Criostato para los cortes durante 30 segundos
Hematoxiclina, lavado, eosina, alcohol, xilo, resina, cubreobjetos
Técnica Histológica
Microscopio eléctrico o de campo claro:
- Fijación: Se utiliza formaldehído, glutaraldehído, paraformaldehído o tetraóxido de osmio (OsO4)
- Deshidratación: Se utiliza alcohol etílico (Etanol) o acetona.
- Aclaración: Se utiliza Xilol.
- Inclusión: Es con parafina.
- Corte: Se realiza con un aparato llamado Micrótomo, el cual realiza cortes de 7 micras.
- Tincion: Hematoxilina & Eosina (H&E)
-Histokinette Aparato que lleva a cabo la técnica histológica de forma autómatica.
Microscopía electrónica:
- Fijación: Se utiliza gluteraldehído o tetraóxido de osmio.
- Deshidratación: Se utiliza acetona.
- Aclaración: Se utiliza óxido de propileno (PO).
- Inclusión: Es con resina epóxica.
- Corte: Se realiza con un aparato llamado ultramicrótomo, el cual realiza cortes de 70 nanómetros.
- Impregnacion: Con metales pesados como plomo ó uranilo.
Tipos de tinciones:
Hematoxilina y Eosina:
Hematoxilina por ser básica se encarga de teñir estructuras ácidas en colores azul y púrpura.
- Núcleos celulares
Eosina es ácida y tiñe componentes básicos en tonos color rosa.
- Citoplasma
Ácido Peryódico de Schiff (PAS): se encarga de teñir los carbohidratoso glúcidos y macromoléculas ricas en ellos.
Wright: se usa para tinciones sanguíneas.
Tricrómico de Masson: se usan 3 colorantes distintos para teñir el núcleo, las fibras de colágeno y el citoplasma.
Sudán III, IV y Negro: Se usa para teñir lípidos.
Faloidina: Tiñe filamentos de actina.
Azul de toluidina: se especializa en teñir los núcleos.
Azul de metileno: tiñe partes del cuerpo en una cirugía.
Sales de plata: Se tiñen neurofibrillas
Colorantes para el papanicolaou:
- Orange G: pinta citoplasmas.
- Hematoxilina: pinta los núcleos.
- EA65: pinta citoplasmas.
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